IRMM-355 糞腸球菌 (CIP 106877)標準品樣品的描述每個(gè)小瓶包含一個(gè)糞腸球菌的物質(zhì)球體(CIP 106877)

IRMM-355 糞腸球菌 (CIP 106877)分別用于根據ISO 7218[1]和ISO 7899-2[2]，在馬血瓊脂或斯蘭內茨和巴特利瓊脂上菌落計數測定糞腸球菌。該制劑中的細菌細胞在室溫下不能存活。因此，在分析過(guò)程中，從冰箱中逐個(gè)拿出小瓶。在所有步驟中都要使用無(wú)菌耗材，并在無(wú)菌條件下工作。

馬血瓊脂（標準電鍍）

1。每個(gè)材料球使用10個(gè)適當條件的介質(zhì)板。

2.通過(guò)無(wú)菌地去除塞子，打開(kāi)含有材料球體的小瓶。

3.向小瓶中加入1 mL的氯化鈉水溶液(質(zhì)量濃度為0.9 g/L)。等待30秒，通過(guò)上下移液來(lái)均勻化。

4.通過(guò)將9份100µL和10個(gè)瓊脂平板上，確保盡可能從小瓶中除去液體。

5.使用一個(gè)一次性無(wú)菌撒布機(無(wú)玻璃撒布機）將溶解的材料均勻地攤鋪在板表面，避免板的邊緣。

6.在最后一個(gè)板的瓊脂表面上輕輕上下移動(dòng)其上的末端5次，以幫助去除其上的任何剩余液體。

7.在室溫下干燥盤(pán)子30分鐘，然后再倒置。

8.在37°C±1°C下孵育14小時(shí)至24小時(shí)。

Slanetz和Bartley瓊脂（膜過(guò)濾）

1。每個(gè)材料球使用20個(gè)適當條件的介質(zhì)板。

2.通過(guò)無(wú)菌地去除塞子，打開(kāi)含有材料球體的小瓶。

3.向小瓶中加入1 mL的氯化鈉水溶液(質(zhì)量濃度為0.9 g/L)。等待30秒，通過(guò)上下移液來(lái)均勻化。

4.確保將19份50µL和一部分含有剩余溶液的液體分配到20個(gè)獵.鷹管上，每個(gè)管中含有10 mL的氯化鈉水溶液(質(zhì)量濃度為0.9g/L)。

5.使用帶有真空歧管的膜過(guò)濾裝置在每個(gè)Falcon管中過(guò)濾溶液，并使用包含47 mm膜(孔徑0.45µm)的過(guò)濾漏斗：

5a。將溶液倒在過(guò)濾器上，吸出

5b。激活吸力以除去溶液

5c。用10 mL的氯化鈉(質(zhì)量濃度為0.9 g/L)水溶液沖洗Falcon管，關(guān)閉吸力后倒入過(guò)濾器。

5d.激活吸力，取出溶液

5e。重復沖洗（共清洗2次）

6.用無(wú)菌鑷子把過(guò)濾器放在瓊脂平板上。

7.在室溫下放置盤(pán)子30分鐘，然后再翻轉。

8.在36°C±2°C下孵育40小時(shí)至44小時(shí)。

存儲

IRMM-355 糞腸球菌 (CIP 106877)標準品瓶應立即使用，也可以存儲在-20°C或-70°C。如果儲存在-20°C下，應避免稍后的溫度轉移回-70°C，因為我們對隨后的儲存溫度變化對細菌細胞活力和恢復的影響知之甚少。然而，歐盟委員會(huì )不能對在客戶(hù)的場(chǎng)所儲存材料期間發(fā)生的變化負責，特別是對打開(kāi)的樣品。

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