IRMM-354 白色念珠菌 (NCPF 3179)標準品樣品的描述每個(gè)小瓶包含一個(gè)白色念珠菌的材料球(NCPF 3179)。

本CRM分別用于根據ISO 7218[1]和ISO 13681[2]，在營(yíng)養瓊脂或OGYE瓊脂上菌落計數測定白色念珠菌。這種制劑中的酵母細胞在室溫下不能存活。因此，在分析過(guò)程中，從冰箱中逐個(gè)拿出小瓶。在所有步驟中都要使用無(wú)菌耗材，并在無(wú)菌條件下工作。

1.每個(gè)材料球使用10個(gè)適當條件的介質(zhì)板。對于OGYE瓊脂，采用了倒鍍技術(shù)（見(jiàn)下文）。使用空培養皿，根據制造商的說(shuō)明準備培養基。

2.通過(guò)無(wú)菌地去除塞子，打開(kāi)含有材料球體的小瓶。

3.向小瓶中加入1 mL的氯化鈉水溶液(質(zhì)量濃度為0.9 g/L)。孵育30秒，通過(guò)上下移液均質(zhì)。

NA（標準電鍍）

4。通過(guò)在10個(gè)瓊脂平板上分配10份100µL，確保盡可能地從小瓶中除去液體。

5.使用一個(gè)一次性無(wú)菌撒布機(無(wú)玻璃撒布機）將溶解的材料均勻地攤鋪在板表面，避免板的邊緣。

6.在最后一個(gè)板的瓊脂表面上輕輕上下移動(dòng)傳播者的末端5次，以幫助清除傳播者上的任何多余的液體。

7.在室溫下干燥盤(pán)子30分鐘，然后再倒置。

8.在37°C±1°C下孵育36小時(shí)至48小時(shí)。

OGYE瓊脂（倒入鍍層）

4。通過(guò)在10個(gè)空培養皿上分發(fā)10份100µL，確保盡可能地從小瓶中去除液體。

5.加入或倒入約15 mL的熔融(OGYE)瓊脂，冷卻至45°C，并立即旋轉以攪拌均勻。每次在盤(pán)子中加入瓊脂后旋轉。不要等到瓊脂被添加到所有的盤(pán)子里再去了。

6.先在室溫下凝固和干燥，45分鐘，然后翻轉。

7.在25°C±1°C下孵育36小時(shí)至48小時(shí)。

存儲

IRMM-354 白色念珠菌 (NCPF 3179)標準品瓶應立即使用，也可以存儲在-20°C或-70°C。在-20°C或-70°C下保存長(cháng)達18個(gè)月時(shí)，未檢測到該材料的不穩定性。然而，如果儲存在-20°C下，應避免稍后的溫度轉移回-70°C，因為對后續儲存溫度變化對酵母細胞活力和恢復的影響知之甚少。然而，歐盟委員會(huì )不能對在客戶(hù)的場(chǎng)所儲存材料期間發(fā)生的變化負責，特別是對打開(kāi)的樣品。

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